服務熱線
021-54479081
021-54461587
-
ELISA試劑盒的應用與操作步驟
發(fā)布時間： 2013-10-28 點擊次數(shù)： 1233次ELISA試劑盒的應用：
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
ELISA試劑盒的操作步驟：一、雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
二、間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌;
6.’zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
研域（上海）化學試劑主要代理產品：
ELISA試劑盒：ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,雞、鴨、猴、兔的ELISA試劑盒。
進口培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,大腸桿菌O157培養(yǎng)基,細菌總數(shù)培養(yǎng)基,弧菌檢驗培養(yǎng)基,李斯特氏菌檢驗培養(yǎng)基。
血清：胎牛血清,人血清,動物血清。
生物試劑：Amresco,Sigma,Spectrum進口試劑。
標準品對照品：進口對照品,進口對照藥材,進口標準品,進口標準試劑。
我司秉承專注品質、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務的企業(yè)文化積極參與生物領域的技術創(chuàng)新和技術服務，力求為我國科研事業(yè)添磚加瓦。研域（上海）化學試劑有限公司開展了雙11*活動，活動期間所有產品五折優(yōu)惠，另外還有驚喜大獎等你來拿，歡迎廣大客戶。
- 上一篇：干細胞培育視網膜：可恢復老鼠視力
- 下一篇：ELISA試劑盒實驗“花板”問題分析
產品中心
Products