无套内谢孕妇毛片免费看看丨国内女人喷潮完整视频丨精品国产av色一区二区深夜久久丨夜夜躁日日躁狠狠久久av丨情侣黄网站免费看

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 公司動態NEWS

    您當前的位置:首頁 > 公司動態 > 固體在ELISA試劑盒樣本處理方法

    固體在ELISA試劑盒樣本處理方法

    發布時間: 2016-12-09  點擊次數: 1299次

    ELISA試劑盒稱取1g的固體樣本,用9g的合適緩沖液溶解,分泌蛋白可以直接離心取上清檢測,細胞內的蛋白,要先收集細胞,再用合適方法破碎,離心取上清測試。
    1、組織標本:切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。對于植物組織,不好勻漿的話,就用液氮研磨,將植物組織放在研缽中,加入適量液氮,充分研磨。

    2、細胞內蛋白樣本:
    許多待測蛋白不是分泌蛋白,而是存在于細胞內的蛋白,這個時候,要先收集細胞,洗滌干凈,再破碎細胞,離心取上清。
    (1)培養的細胞
    A、動物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融(如果反復凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    B、植物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設置破碎2s,冷卻30s的方式,充分破碎細胞,以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
    (2)組織的細胞
    切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
    3、土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。
    4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干液體,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。
    ELISA試劑盒植物標本的采集及保存 
    1、 稱取0.1g(誤差±3%以內)新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;

    2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度;
    3、 于4度,8000rpm,離心1小時,取上清;
    4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存備用;
    5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容)?;靹蚝笫覝胤胖?0分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。
    ELISA試劑盒樣本收集注意事項
    1、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    2、標本采集后盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
    3、我們羅列的是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發表的文獻,自行設計合理的樣本處理方法。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 人妻精品人妻无码一区二区三区| 女人裸体做爰免费视频| 人妻中出无码中字在线| 美日韩成人| 老司机午夜免费精品视频| 国产女人被狂躁到高潮小说| 久久99精品久久久久久| 久久男女视频| 怡红院a∨人人爰人人爽| 久久久精品国产99久久精品麻追 | 一本加勒比hezyo中文无码| 国产免费av一区二区三区| 日本高清一区免费中文视频| 无码人妻久久一区二区三区蜜桃| 新影音先锋男人色资源网| 天干天干天啪啪夜爽爽av小说| 欧美疯狂性受xxxxx另类| 婷婷色一区二区三区| 国产精品无码一区二区三区不卡| 色欲天天天综合网| 精品国产一区二区三区在线观看| 国产福利精品一区二区| 天天综合天天做| 92午夜福利少妇系列| 麻豆果冻传媒精品| 精品剧情v国产在线观看| 东北老头嫖妓猛对白精彩| 国产精品毛多多水多| 久草视频在线看| 午夜爱爱福利| 98色婷婷在线| 毛片一区二区三区无码| 久久亚洲国产成人影院| 国产av成人一区二区三区| 初尝人妻少妇中文字幕| 四虎国产精品永久在线国在线| 成全世界免费高清观看| 伊伊人成亚洲综合人网7777|